Western Blot

    免疫印跡immunoblotting又稱蛋白質印跡western blot，它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。Western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。Western blot常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。  
    華科鑒聯基因科技為提供標準western blot技術服務（您只需提供樣本），并對band進行灰度分析，得出蛋白表達相對定量結果。

服務要求

    需新鮮或正確保存的蛋白樣品或者蛋白粗提液，陽性對照樣品（如果有）， 檢測目的蛋白的一抗（或由華科鑒聯基因科技代購）。組織樣品不少于50mg；細胞不少于5×106個；總蛋白濃度不低于 2μg/μl（至少50μl）。

服務基本流程

    1. 蛋白提取和定量（如果提供蛋白樣品，則直接電泳預實驗檢測抗體特異性）；
    2. SDS-PAGE 10-15% 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳；
    3. 轉膜（PVDF膜）；
    4. 封閉 （5%脫脂奶粉）；
    5. 一抗孵育（其中內參基因為Tubulin或HistoneH3.1）；
    6. 二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成實驗無法繼續，則收相關預實驗費用）；
    7. 顯色（ECL）；
    8. 曝光、洗片、灰度分析；

實驗報告內容

    蛋白濃度，膠片，膜，以及灰度分析（如果需要）及實驗報告