• 熒光定量PCR實驗

    熒光定量PCR檢測
        熒光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。由于Real-time qPCR的眾多優點,現在已經是生命科學領域的一項重要技術,并成為基因表達差異和文章發表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數據不同于常規PCR電泳檢測,很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數據處理分析感到迷惑。很多時候,盡管知曉qPCR的原理和基本操作,仍然浪費時間和精力,而得不到好的結果或對大量的數據不知所措。  
        華科鑒聯基因科技提供的real-time qPCR技術服務,根據實驗目的,設計實驗方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標準(MIQE)的real-time qPCR試劑完成實驗,提供符合文章發表的客觀事實實驗報告和原始數據。
    服務要求
        需提供新鮮或保存完好的細胞(至少5×106)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好);或反轉錄好的cDNA不少于30μl(反轉錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間); 同時提供待測基因序列或登錄號。
    報告內容
        熒光定量PCR實驗報告包括總RNA(或DNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及數據統計分析(可選),實驗報告以及剩余引物和模板(華科鑒聯基因科技可保存1個月)
    實驗報告部分組成
     
    服務編號 服務項目 內容說明 價格 周期
      相對定量SYBR Green I染料法 基礎費用 引物合成,擴增效率 ¥1000/基因 2-3周※
    HKGENEQP01 樣品檢測費用 檢測樣品數<10 ¥200/樣品•基因
    HKGENEQP02 10≤檢測樣品數≤20 ¥160/樣品•基因
    HKGENEQP03 檢測樣品數>20 ¥120/樣品•基因 3-4周※
      相對定量探針法 基礎費用 包含一條探針合成和標準曲線 ¥2600/基因 4-5周※
    HKGENEQP04 樣品檢測費用 檢測樣品數<10 ¥200/樣品•基因
    HKGENEQP05 10≤檢測樣品數≤20 ¥160/樣品•基因
    HKGENEQP06 檢測樣品數>20 ¥120/樣品•基因
      絕對定量探針法 基礎費用 標準品,標準曲線,和一條探針合成 ¥3500/基因 4-5周※
    HKGENEQP07 樣品檢測費用 檢測樣品數<10 ¥200/樣品•基因
    HKGENEQP08 10≤檢測樣品數≤20 ¥160/樣品•基因
    HKGENEQP09 檢測樣品數>20 ¥120/樣品•基因
      絕對定量SYBR GreenI法 基礎費用 標準品,標準曲線 ¥2000/基因 3-4周※
    HKGENEQP10 樣品檢測費用 檢測樣品數<10 ¥200/樣品•基因
    HKGENEQP11 10≤檢測樣品數≤20 ¥160/樣品•基因
    HKGENEQP12 檢測樣品數>20 ¥120/樣品•基因
      miRNA SYBR Green I 相對定量 基礎費用 引物合成,擴增效率 ¥1200/miRNA 3-4周※
    HKGENEQP13 樣品檢測費用 檢測樣品數<10 ¥300/樣品•基因
    HKGENEQP14 檢測樣品數≥20 ¥200/樣品•基因
    HKGENEQP15 引物設計合成 設計引物,≤30堿基,2OD,PAGE級純化 ¥4/堿基 1周
    HKGENEQP16 定量PCR標準品構建 目的序列擴增,連接到載體,質粒拷貝數確定 ¥1000/基因 1-2周
    熒光定量PCR價格里包括樣品制備費用,如DNA,RNA提取,反轉錄等。

    ※:一般情況下,3周-4左右可完成實驗!若遇特殊原因,比如實驗材料降解,需要重新提供樣品或者總RNA需要重新提取;基因表達量較低,需要構建標準品等情況,周期會有所延長。


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